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GB 4789.34-2016 英語 PDF (GB4789.34-2016)
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GB 4789.34-2016: 食品安全国家基準 - 食品微生物学的検査 - ビフィズス菌の検査
GB 4789.34-2016
イギリス
国家標準の
中華人民共和国
国家食品安全基準 - 食品微生物学的
検査 - ビフィズス菌の検査
発行日:2016年12月23日
2017年6月23日に実施
発行者:国家衛生・家族計画委員会
中華人民共和国;
中国食品医薬品局。
3. 何もする必要はありません - この規格の全文は自動的に
0〜60分以内にあなたのメールアドレスに即時配信されます。
目次
序文…3
1 範囲 ... 4
2 設備・資材 ... 4
3 培地と試薬...4
4 検査手順 ... 5
5 操作手順 ... 6
付録A 培地および試薬 ... 12
付録B ビフィズス菌の有機酸代謝物の検出 ... 14
序文
この規格はGB 4789.34-2012国家食品安全規格に代わるものです -
食品微生物学的検査 - ビフィズス菌の同定。
GB 4789.34-2012と比較すると、この規格の主な変更点は次のとおりです。
続きます。
- ビフィズス菌のカウント方法を追加しました。
- MRS培地を追加しました。
- この規格の適用範囲を変更した。
- 付録Bをオプションとして修正しました。
国家食品安全基準 - 食品微生物学的
検査 - ビフィズス菌の検査
1 範囲
この規格は、以下の識別および計数方法を規定する。
ビフィズス菌。
この規格は、純粋な細菌株の同定と計数に適用される。
ビフィズス菌の同定。この規格は細菌の同定に適用される。
食品にビフィズス菌が1種類しか含まれていない場合。この規格は、
ビフィズス菌のみを含む食品の場合、つまり、食品が
1 種類以上の異なるビフィズス菌種を含みます。
2 設備と資材
微生物実験室の日常的な滅菌およびトレーニング機器に加えて、
その他の機材・資材は以下の通りです。
2.1 恒温インキュベーター。36°C ± 1°C。
2.2 冷蔵庫。2℃~5℃。
2.3 天秤。分解能は0.01g。
2.4 滅菌試験管。18mm × 180mm、15mm × 100mm。
2.5 滅菌ピペット。1mL(0.01mL目盛り付き)、10mL(0.1mL目盛り付き)または
マイクロピペット(200μL~1000μL)とそれに適合するチップ。
2.6 滅菌ペトリ皿。直径90mm。
3 培地と試薬
3.1 ビフィズス菌培養培地。A.1を参照。
3.2 PYG培地。A.2を参照。
3.3 MRS培地。A.3を参照。
3.4 メタノール。分析的に純粋。
5 操作手順
5.1 滅菌要件
すべての操作手順は滅菌手順に従う必要があります。
5.2 ビフィズス菌の同定
5.2.1 純粋な細菌種
5.2.1.1 サンプル処理。半固体または液体の種は直接
ビフィズス菌寒天培地またはMRS寒天培地に接種する。固形の場合
細菌または真空凍結乾燥細菌の場合は、適切な量を加える
滅菌生理食塩水またはその他の適切な希釈液を使用して細菌粉末を溶解します。
5.2.1.2 ワクチン接種。ビフィズス菌寒天培地またはMRS寒天培地に接種する。
プレート上で嫌気培養を36℃±1℃で48時間±2時間行い、
72時間±2時間に延長されました。
5.2.2 食品サンプル
5.2.2.1 サンプル処理。25.0g(mL)のサンプルを滅菌円錐容器に採取する。
225.0mLの生理食塩水を入れたフラスコまたは均質バッグ、
8000r/min~10000r/minで1分~2分均質化または叩き
ホモジナイザーで1分~2分撹拌して1.10サンプルを均質化する
凍結したサンプルは2℃~5℃で最大1時間解凍することができます。
18時間または45℃以下の温度で15分以内。
5.2.2.2 接種またはコーティング。上記のサンプルを均質化して接種する
ビフィズス菌寒天培地またはMRS寒天培地に溶液を塗布するか、0.1mLの
サンプル均質化溶液を適切に希釈して均一に塗布する
ビフィズス菌寒天培地またはMRS寒天培地。嫌気培養を
36°C ± 1°C で 48 時間 ± 2 時間、72 時間 ± 2 時間に延長可能。
5.2.2.3 純粋培養。3つ以上のコロニーを採取して接種する。
ビフィズス菌寒天培地またはMRS寒天培地で嫌気性培養を行う。
36°C ± 1°C で 48 時間 ± 2 時間培養し、72 時間 ± 2 時間まで延長することができます。
5.2.3 細菌の同定
5.2.3.1 塗抹顕微鏡検査。ビフィズス菌の単一コロニーを採取し、
ビフィズス菌プレートまたは染色用MRSプレート。ビフィズス菌は
グラム陽性、短い桿状、細長い桿状または球状で、
さまざまな枝や分岐やその他の形態、非酸性、胞子なし、
力。
5.2.3.2 生化学的同定。ビフィズス菌の単一コロニーの採取
5.3.1.2 液体サンプルの調製。サンプル1.0mLを無菌的に秤量する。
9.0mLの希釈液に入れ、よく混ぜて1.10サンプルを均質化する
解決。
5.3.2 食品サンプル
5.3.2.1 サンプル処理。サンプル25.0g(mL)を採取し、滅菌容器に入れる。
生理食塩水225.0mLを入れた三角フラスコまたは均質バッグ、
8000r/min~10000r/minで1分~2分均質化、または叩き
ホモジナイザーで1分~2分撹拌して1.10サンプルを均質化する
凍結したサンプルは2℃~5℃で最大1時間解凍することができます。
18時間または45°Cで15分以内。
5.3.3 連続希釈と培養
1mL滅菌ピペットまたはマイクロピペットを使用して10回の連続サンプルを調製する
均質化溶液、8000r/min~10000r/minで1分間均質化~
2分、または叩きホモジナイザーを使用して1分〜2分混ぜます。
1mLの滅菌ピペットまたはピペットヘッドを1回交換する。
サンプル濃度の推定には、2~3個のサンプルを選択する
適切な希釈度の均質化溶液。10回行う場合
希釈度を上げるには、滅菌プレートに1.0mLのサンプルをピペットで入れます。2枚のプレートで
それぞれの希釈液について、それぞれ1.0mLのブランク希釈液をピペットで分注し、
ブランクコントロール用の滅菌プレート2枚。15mL~20mLの
46℃に冷却したビフィズス菌寒天培地またはMRS寒天培地(
断熱のため46℃±1℃の恒温水槽に入れた
プレートを回転させ、均一に混合します。サンプルの希釈からプレートまで
注ぐのに15分かかります。寒天が固まったら、プレートをひっくり返し、
嫌気性培養は36°C ± 1°Cで48時間 ± 2時間行い、72時間 ± 2時間まで延長できます。
培養後、プレート上のコロニーの数を数えます。
5.3.4 コロニーカウント
5.3.4.1 必要に応じて、肉眼で観察できる。
虫眼鏡やコロニーカウンターで希釈倍率と
コロニー数は、
コロニー形成単位(CFU)。
5.3.4.2 30CFUの間でカウントされたコロニーの総数を選択する
300CFU、およびフレークコロニーを含まないコロニーの総数。記録
プレート上の特定のコロニーの数が30CFU未満の場合。それを超えると
300CFUでは、無数に記録できます。希釈液あたりのコロニー数
2枚のプレートの平均となります。
5.3.4.3 プレートの1つに大きなフレークコロニーが成長している場合は、
使用される。フレークコロニーのないプレートをコロニーの数として使用する。
この希釈度。薄片コロニーの数がプレートの半分未満で、
付録A
培地と試薬
A.1 ビフィズス菌寒天培地
A.1.1 原材料
ペプトン 15.0g
酵母エキス 20.0g
グルコース 20.0 g
水溶性デンプン 0.5g
塩化ナトリウム 5.0g
トマトエキス 400.0mL
トゥイーン80 1.0mL
レバーパウダー 0.3g
寒天粉末 20.0g
蒸留水を加えて1000.0mLにする
A.1.2 準備
A.1.2.1 事前...
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GB 4789.34-2016
イギリス
国家標準の
中華人民共和国
国家食品安全基準 - 食品微生物学的
検査 - ビフィズス菌の検査
発行日:2016年12月23日
2017年6月23日に実施
発行者:国家衛生・家族計画委員会
中華人民共和国;
中国食品医薬品局。
3. 何もする必要はありません - この規格の全文は自動的に
0〜60分以内にあなたのメールアドレスに即時配信されます。
目次
序文…3
1 範囲 ... 4
2 設備・資材 ... 4
3 培地と試薬...4
4 検査手順 ... 5
5 操作手順 ... 6
付録A 培地および試薬 ... 12
付録B ビフィズス菌の有機酸代謝物の検出 ... 14
序文
この規格はGB 4789.34-2012国家食品安全規格に代わるものです -
食品微生物学的検査 - ビフィズス菌の同定。
GB 4789.34-2012と比較すると、この規格の主な変更点は次のとおりです。
続きます。
- ビフィズス菌のカウント方法を追加しました。
- MRS培地を追加しました。
- この規格の適用範囲を変更した。
- 付録Bをオプションとして修正しました。
国家食品安全基準 - 食品微生物学的
検査 - ビフィズス菌の検査
1 範囲
この規格は、以下の識別および計数方法を規定する。
ビフィズス菌。
この規格は、純粋な細菌株の同定と計数に適用される。
ビフィズス菌の同定。この規格は細菌の同定に適用される。
食品にビフィズス菌が1種類しか含まれていない場合。この規格は、
ビフィズス菌のみを含む食品の場合、つまり、食品が
1 種類以上の異なるビフィズス菌種を含みます。
2 設備と資材
微生物実験室の日常的な滅菌およびトレーニング機器に加えて、
その他の機材・資材は以下の通りです。
2.1 恒温インキュベーター。36°C ± 1°C。
2.2 冷蔵庫。2℃~5℃。
2.3 天秤。分解能は0.01g。
2.4 滅菌試験管。18mm × 180mm、15mm × 100mm。
2.5 滅菌ピペット。1mL(0.01mL目盛り付き)、10mL(0.1mL目盛り付き)または
マイクロピペット(200μL~1000μL)とそれに適合するチップ。
2.6 滅菌ペトリ皿。直径90mm。
3 培地と試薬
3.1 ビフィズス菌培養培地。A.1を参照。
3.2 PYG培地。A.2を参照。
3.3 MRS培地。A.3を参照。
3.4 メタノール。分析的に純粋。
5 操作手順
5.1 滅菌要件
すべての操作手順は滅菌手順に従う必要があります。
5.2 ビフィズス菌の同定
5.2.1 純粋な細菌種
5.2.1.1 サンプル処理。半固体または液体の種は直接
ビフィズス菌寒天培地またはMRS寒天培地に接種する。固形の場合
細菌または真空凍結乾燥細菌の場合は、適切な量を加える
滅菌生理食塩水またはその他の適切な希釈液を使用して細菌粉末を溶解します。
5.2.1.2 ワクチン接種。ビフィズス菌寒天培地またはMRS寒天培地に接種する。
プレート上で嫌気培養を36℃±1℃で48時間±2時間行い、
72時間±2時間に延長されました。
5.2.2 食品サンプル
5.2.2.1 サンプル処理。25.0g(mL)のサンプルを滅菌円錐容器に採取する。
225.0mLの生理食塩水を入れたフラスコまたは均質バッグ、
8000r/min~10000r/minで1分~2分均質化または叩き
ホモジナイザーで1分~2分撹拌して1.10サンプルを均質化する
凍結したサンプルは2℃~5℃で最大1時間解凍することができます。
18時間または45℃以下の温度で15分以内。
5.2.2.2 接種またはコーティング。上記のサンプルを均質化して接種する
ビフィズス菌寒天培地またはMRS寒天培地に溶液を塗布するか、0.1mLの
サンプル均質化溶液を適切に希釈して均一に塗布する
ビフィズス菌寒天培地またはMRS寒天培地。嫌気培養を
36°C ± 1°C で 48 時間 ± 2 時間、72 時間 ± 2 時間に延長可能。
5.2.2.3 純粋培養。3つ以上のコロニーを採取して接種する。
ビフィズス菌寒天培地またはMRS寒天培地で嫌気性培養を行う。
36°C ± 1°C で 48 時間 ± 2 時間培養し、72 時間 ± 2 時間まで延長することができます。
5.2.3 細菌の同定
5.2.3.1 塗抹顕微鏡検査。ビフィズス菌の単一コロニーを採取し、
ビフィズス菌プレートまたは染色用MRSプレート。ビフィズス菌は
グラム陽性、短い桿状、細長い桿状または球状で、
さまざまな枝や分岐やその他の形態、非酸性、胞子なし、
力。
5.2.3.2 生化学的同定。ビフィズス菌の単一コロニーの採取
5.3.1.2 液体サンプルの調製。サンプル1.0mLを無菌的に秤量する。
9.0mLの希釈液に入れ、よく混ぜて1.10サンプルを均質化する
解決。
5.3.2 食品サンプル
5.3.2.1 サンプル処理。サンプル25.0g(mL)を採取し、滅菌容器に入れる。
生理食塩水225.0mLを入れた三角フラスコまたは均質バッグ、
8000r/min~10000r/minで1分~2分均質化、または叩き
ホモジナイザーで1分~2分撹拌して1.10サンプルを均質化する
凍結したサンプルは2℃~5℃で最大1時間解凍することができます。
18時間または45°Cで15分以内。
5.3.3 連続希釈と培養
1mL滅菌ピペットまたはマイクロピペットを使用して10回の連続サンプルを調製する
均質化溶液、8000r/min~10000r/minで1分間均質化~
2分、または叩きホモジナイザーを使用して1分〜2分混ぜます。
1mLの滅菌ピペットまたはピペットヘッドを1回交換する。
サンプル濃度の推定には、2~3個のサンプルを選択する
適切な希釈度の均質化溶液。10回行う場合
希釈度を上げるには、滅菌プレートに1.0mLのサンプルをピペットで入れます。2枚のプレートで
それぞれの希釈液について、それぞれ1.0mLのブランク希釈液をピペットで分注し、
ブランクコントロール用の滅菌プレート2枚。15mL~20mLの
46℃に冷却したビフィズス菌寒天培地またはMRS寒天培地(
断熱のため46℃±1℃の恒温水槽に入れた
プレートを回転させ、均一に混合します。サンプルの希釈からプレートまで
注ぐのに15分かかります。寒天が固まったら、プレートをひっくり返し、
嫌気性培養は36°C ± 1°Cで48時間 ± 2時間行い、72時間 ± 2時間まで延長できます。
培養後、プレート上のコロニーの数を数えます。
5.3.4 コロニーカウント
5.3.4.1 必要に応じて、肉眼で観察できる。
虫眼鏡やコロニーカウンターで希釈倍率と
コロニー数は、
コロニー形成単位(CFU)。
5.3.4.2 30CFUの間でカウントされたコロニーの総数を選択する
300CFU、およびフレークコロニーを含まないコロニーの総数。記録
プレート上の特定のコロニーの数が30CFU未満の場合。それを超えると
300CFUでは、無数に記録できます。希釈液あたりのコロニー数
2枚のプレートの平均となります。
5.3.4.3 プレートの1つに大きなフレークコロニーが成長している場合は、
使用される。フレークコロニーのないプレートをコロニーの数として使用する。
この希釈度。薄片コロニーの数がプレートの半分未満で、
付録A
培地と試薬
A.1 ビフィズス菌寒天培地
A.1.1 原材料
ペプトン 15.0g
酵母エキス 20.0g
グルコース 20.0 g
水溶性デンプン 0.5g
塩化ナトリウム 5.0g
トマトエキス 400.0mL
トゥイーン80 1.0mL
レバーパウダー 0.3g
寒天粉末 20.0g
蒸留水を加えて1000.0mLにする
A.1.2 準備
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